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伯樂 iQ-Check 彎曲桿菌 PCR 試劑盒關鍵使用要點與解決方案

更新時間:2025-10-11      點擊次數:220

選擇伯樂 iQ-Check 彎曲桿菌實時熒光定量 PCR 檢測試劑盒,意味著您已采用食源性致病菌監(jiān)控。為確保檢測結果準確可靠、流程順暢高效,我們總結了關鍵使用注意事項及針對性解決方案,助您發(fā)揮試劑盒性能。

核心注意事項與專業(yè)解決方案

1. 樣本前處理:消除抑制物干擾

注意點:

食品樣本(尤其高脂/高蛋白基質如禽肉、乳制品)或環(huán)境樣本中可能含有 PCR 抑制物(如脂肪、腐殖酸、清潔劑殘留),影響核酸提取效率與擴增效果。

解決方案:

嚴格遵循配套方案: 使用伯樂驗證推薦的 自動化核酸提取試劑盒及平臺 (如 Aurum™ 系列),其優(yōu)化裂解與純化步驟能有效去除絕大多數抑制物。

樣本均質標準化: 確保樣本按說明書要求充分均質,控制取樣量,避免基質過載。

利用內源對照監(jiān)控: 試劑盒內置 Internal Control 實時監(jiān)控每一步驟。若 IC 信號異常(如 Ct 值延遲),提示存在抑制或提取問題,需復查前處理流程。

2. 避免交叉污染:保障結果特異性

注意點:

PCR 技術靈敏度高,實驗環(huán)境或操作中的交叉污染可能導致假陽性結果。

解決方案:

分區(qū)操作: 嚴格執(zhí)行 試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增分析區(qū) 三區(qū)物理分離,使用獨立移液器與耗材。

防污染設計: 使用含 dUTP/UDG 防污染系統(tǒng) 的預混液(iQ-Check 系列標配),可降解既往擴增產物,杜絕殘留污染。

陰性對照設置: 每批次檢測必須包含 提取陰性對照 和 PCR 陰性對照 ,監(jiān)控環(huán)境與試劑本底。

3. 設備適配與程序優(yōu)化:確保擴增效率

注意點:

非推薦機型或錯誤程序設置可能導致擴增效率下降、靈敏度降低。

解決方案:

兼容設備: 強烈推薦搭配伯樂 CFX Opus 系列實時熒光定量 PCR 儀 。儀器內置經過驗證的預置程序,一鍵啟動標準化檢測流程。

參數勿隨意修改: 若使用其他品牌儀器,嚴格參照說明書要求設置退火/延伸溫度與時間,避免自行調整循環(huán)參數。

定期校準維護: 按廠商指南對 PCR 儀進行光學校準與熱循環(huán)性能驗證。

4. 試劑保存與穩(wěn)定性:維持最佳性能

注意點:

反復凍融、高溫或光照可能降低酶活性,影響檢測限。

解決方案:

規(guī)范儲存: 未開封試劑盒按要求 -15°C 至 -25°C 冷凍避光保存 。解凍后預混液建議分裝使用,避免 >4 次凍融循環(huán)。

即用即取: 配制反應液時,試劑置于冰上操作。完成分裝后立即放回低溫環(huán)境。

批次記錄: 清晰標記試劑開瓶日期與凍融次數,過期勿用。

5. 結果判讀與驗證:提升數據可靠性

注意點:

弱陽性樣本(Ct 值接近cut-off)或曲線異常需謹慎判讀。

解決方案:

雙重復檢測: 對臨界值樣本或異常曲線進行 重復檢測 ,確認結果重現性。

結合內對照: 確保 Internal Control Ct 值在有效范圍內(參考說明書),否則結果無效需重提核酸。

陽性對照驗證: 每批次必須包含 試劑盒提供陽性對照 ,確認整個檢測體系有效性。

為何選擇 iQ-Check 方案能規(guī)避常見風險?

一體化解決方案: 從核酸提取到擴增分析,伯樂提供 經系統(tǒng)驗證的配套產品組合 ,減少兼容性風險。

智能分析軟件: CFX Maestro™ 軟件自動分析擴增曲線,內置算法識別異常,減少人為誤判。

全球驗證背書: 試劑盒通過 AOAC-RI、AFNOR 等國際認證 ,性能參數經嚴格評估,確保方法穩(wěn)健性。

專業(yè)技術支持: 伯樂提供全周期應用支持,包括方案優(yōu)化、故障排查與人員培訓。